008240612s2023      us  |||||||||||||||c||eng  d
■001000016931651
■00520240214100058
■006m          o    d                
■007cr#unu||||||||
■020    ▼a9798379620899
■035    ▼a(MiAaPQ)AAI30318917
■040    ▼aMiAaPQ▼cMiAaPQ
■0820  ▼a574
■1001  ▼aLopez,  Jocelyne.▼0(orcid)0000-0002-5626-7818
■24510▼aInvestigating  Novel  Roles  and  Regulation  of  SPRED  Proteins  in  MAPK  Signaling▼h[electronic  resource]
■260    ▼a[S.l.]:▼bUniversity  of  California,  San  Francisco.  ▼c2023
■260  1▼aAnn  Arbor  :▼bProQuest  Dissertations  &  Theses,  ▼c2023
■300    ▼a1  online  resource(73  p.)
■500    ▼aSource:  Dissertations  Abstracts  International,  Volume:  84-12,  Section:  B.
■500    ▼aAdvisor:  Jura,  Natalia.
■5021  ▼aThesis  (Ph.D.)--University  of  California,  San  Francisco,  2023.
■506    ▼aThis  item  must  not  be  sold  to  any  third  party  vendors.
■520    ▼aSprouty-related  EVH-1  domain-containing  (SPRED)  proteins  are  a  family  of  proteins  that  negatively  regulate  the  RAS-MAPK  pathway,  which  is  involved  in  the  regulation  of  the  mitogenic  response  and  cell  proliferation.  However,  the  mechanism  by  which  these  proteins  affect  RASMAPK  signaling  has  not  been  fully  elucidated.  Patients  with  mutations  in  SPRED  give  rise  to  unique  disease  phenotypes,  thus  we  hypothesized  that  distinct  interactions  across  SPRED  proteins  may  account  for  alternative  nodes  of  regulation.  Chapter  2  shows  our  efforts  to  characterize  the  SPRED  interactome  and  evaluate  how  members  of  the  SPRED  family  function  through  unique  binding  partners,  here  we  performed  affinity  purification  mass  spectrometry.  We  identified  90-  kDa  ribosomal  S6  kinase  2  (RSK2)  as  a  specific  interactor  of  SPRED2,  but  not  SPRED1  or  SPRED3.  We  identified  that  the  N-terminal  kinase  domain  of  RSK2  mediates  interaction  between  amino  acids  123-201  of  SPRED2.  Using  X-ray  crystallography,  we  determined  the  structure  of  the  SPRED2-RSK2  complex  and  identified  the  SPRED2  motif,  F145A,  as  critical  for  interaction.  Additionally,  we  found  that  formation  of  this  interaction  is  regulated  by  MAPK  signaling  events.  We  also  find  that  that  this  interaction  between  SPRED2  and  RSK2  has  functional  consequences,  whereby  knockdown  of  SPRED2  resulted  in  increased  phosphorylation  of  RSK  substrates,  YB1  and  CREB.  Furthermore,  SPRED2  knockdown  hindered  phospho-RSK  membrane  and  nuclear  subcellular  localization.  Lastly,  we  report  that  disruption  of  the  SPRED2-RSK  complex  has  effects  on  RAS-MAPK  signaling  dynamics.  Overall,  our  analysis  reveals  that  members  of  the  SPRED  family  have  unique  protein  binding  partners  and  describes  the  molecular  and  functional  determinants  of  SPRED2-RSK2  complex  dynamics.Model  organism  are  important  tools  to  investigate  molecular  mechanisms  in  vivo.  In  effort  to  evaluate  the  molecular  mechanisms  of  SPRED2  in  vivo,  we  set  out  to  use  a  previously  published  SPRED2  mouse  models.  However,  when  undergoing  studies,  we  observed  several  discrepancies  in  the  mice  phenotypes.  Chapter  3  is  a  letter  to  editor,  in  response  to  the  discrepancies  we  observed  in  these  mice.
■590    ▼aSchool  code:  0034.
■650  4▼aBiochemistry.
■650  4▼aMolecular  biology.
■650  4▼aCellular  biology.
■653    ▼aCell  signaling
■653    ▼aNeurofibromin
■653    ▼aMAPK  signaling
■653    ▼aSPRED  proteins
■690    ▼a0487
■690    ▼a0307
■690    ▼a0379
■71020▼aUniversity  of  California,  San  Francisco▼bBiochemistry  and  Molecular  Biology.
■7730  ▼tDissertations  Abstracts  International▼g84-12B.
■773    ▼tDissertation  Abstract  International
■790    ▼a0034
■791    ▼aPh.D.
■792    ▼a2023
■793    ▼aEnglish
■85640▼uhttp://www.riss.kr/pdu/ddodLink.do?id=T16931651▼nKERIS▼z이  자료의  원문은  한국교육학술정보원에서  제공합니다.
■980    ▼a202402▼f2024