008240612s2023      us  |||||||||||||||c||eng  d
■001000016934127
■00520240214101531
■006m          o    d                
■007cr#unu||||||||
■020    ▼a9798380850414
■035    ▼a(MiAaPQ)AAI30571749
■040    ▼aMiAaPQ▼cMiAaPQ
■0820  ▼a574
■1001  ▼aMcQuown,  Alexander  J.▼0(orcid)0000-0002-7850-6437
■24512▼aA  Dedicated  Chaperone  System  Essential  for  Biogenesis  of  Eukaryotic  Translation  Elongation  Factor  1A▼h[electronic  resource]
■260    ▼a[S.l.]:▼bHarvard  University.  ▼c2023
■260  1▼aAnn  Arbor  :▼bProQuest  Dissertations  &  Theses,  ▼c2023
■300    ▼a1  online  resource(260  p.)
■500    ▼aSource:  Dissertations  Abstracts  International,  Volume:  85-05,  Section:  B.
■500    ▼aAdvisor:  Denic,  Vladimir.
■5021  ▼aThesis  (Ph.D.)--Harvard  University,  2023.
■506    ▼aThis  item  must  not  be  sold  to  any  third  party  vendors.
■520    ▼aProtein  folding  is  aided  by  molecular  chaperones  that  prevent  aggregation  of  unfolded  or  partially  folded  intermediates  and  guide  them  to  their  native  states.  Chaperones  engage  clients  through  cycles  of  binding  and  release  from  aggregation-prone  non-native  regions.  Released  clients  can  fold  into  native  states  or  be  recaptured  for  another  chaperone  cycle.  ATP-dependent  chaperones  utilize  ATP  hydrolysis  to  drive  chaperone  conformational  changes  between  low  and  high  affinity  states,  while  ATP-independent  chaperones  are  regulated  by  diverse  mechanisms.Expression  of  the  core  chaperone  network  is  controlled  by  the  transcriptional  regulator  Heat  shock  factor  1  (Hsf1).  The  Hsf1  regulon  contains  canonical  chaperone  machinery  as  well  as  the  conserved  and  essential  zinc-finger  protein  Zpr1,  whose  essential  function  in  archaea  and  eukaryotes  has  remained  unknown.  We  found  that  Zpr1  is  a  novel  ATP-independent  chaperone  required  for  biogenesis  of  highly  abundant  eukaryotic  translation  elongation  factor  1A  (eEF1A).  Zpr1  depleted  cells  experience  severe  protein  folding  stress  driven  by  aggregation  of  newly  synthesized  eEF1A.  Prolonged  Zpr1  depletion  causes  eEF1A  insufficiency,  leading  to  translational  stress  and  activation  of  the  integrated  stress  response.  Biochemical  reconstitution  of  eEF1A  folding  showed  that  Zpr1  guides  eEF1A  intermediates  to  a  protease-resistant  state  and  indicated  that  GTP  binding  by  eEF1A  plays  a  role  in  this  process.  Further  analysis  demonstrated  that  Zpr1  chaperones  eEF1A  into  a  GTP  hydrolysis-competent  state,  and  perturbing  GTP  binding  or  hydrolysis  severely inhibits  the  rate  of  eEF1A  folding.  Taken  together,  these  results  suggest  a  central  role  for  eEF1A  GTP  hydrolysis  in  the  Zpr1  mechanism.Next,  we  found  that  the  uncharacterized  protein  Aim29  is  an  eEF1A  biogenesis  factor  whose  loss  causes  eEF1A  aggregation  and  accompanying  protein  folding  stress.  Structural  modeling  using  ColabFold  suggesed  that  Aim29  senses  the  GTP-bound  conformation  of  eEF1A  folding  intermediates  bound  to  Zpr1.  We  validated  this  prediction  using  cell  biological  and  biochemical  reconstitution  approaches  and  additionally  found  that  Aim29  sensing  of  GTP-bound  eEF1A  coupled  to  a  GTP  hydrolysis  event  stimulates  the  release  of  eEF1A  from  the  Zpr1  folding  pathway.  Our  work  identified  a  novel  ATP-independent  chaperone  mechanism  wherein  the  chaperone,  Zpr1,  and  its  co-chaperone,  Aim29,  enable  a  nucleotide  hydrolysis  event  by  their  client  to  facilitate  disassembly  of  the  chaperone-client  complex.
■590    ▼aSchool  code:  0084.
■650  4▼aBiology.
■650  4▼aBiochemistry.
■650  4▼aCellular  biology.
■653    ▼aElongation  factors
■653    ▼aMolecular  chaperones
■653    ▼aProtein  translation
■653    ▼aChaperone  network
■653    ▼aBiochemical  reconstitution
■690    ▼a0306
■690    ▼a0487
■690    ▼a0379
■71020▼aHarvard  University▼bBiology,  Molecular  and  Cellular.
■7730  ▼tDissertations  Abstracts  International▼g85-05B.
■773    ▼tDissertation  Abstract  International
■790    ▼a0084
■791    ▼aPh.D.
■792    ▼a2023
■793    ▼aEnglish
■85640▼uhttp://www.riss.kr/pdu/ddodLink.do?id=T16934127▼nKERIS▼z이  자료의  원문은  한국교육학술정보원에서  제공합니다.
■980    ▼a202402▼f2024