008240612s2023      us  |||||||||||||||c||eng  d
■001000016933362
■00520240214101237
■006m          o    d                
■007cr#unu||||||||
■020    ▼a9798380388085
■035    ▼a(MiAaPQ)AAI30528065
■040    ▼aMiAaPQ▼cMiAaPQ
■0820  ▼a576.6
■1001  ▼aShepley-McTaggart,  Ariel  James.
■24510▼aInvestigating  Host  Regulation  of  the  Filovirus  Lifecycle▼h[electronic  resource]
■260    ▼a[S.l.]:▼bUniversity  of  Pennsylvania.  ▼c2023
■260  1▼aAnn  Arbor  :▼bProQuest  Dissertations  &  Theses,  ▼c2023
■300    ▼a1  online  resource(144  p.)
■500    ▼aSource:  Dissertations  Abstracts  International,  Volume:  85-03,  Section:  B.
■500    ▼aAdvisor:  Harty,  Ronald  N.
■5021  ▼aThesis  (Ph.D.)--University  of  Pennsylvania,  2023.
■506    ▼aThis  item  must  not  be  sold  to  any  third  party  vendors.
■520    ▼aFiloviruses  Ebola  (EBOV)  and  Marburg  (MARV)  are  emerging  pathogens  capable  of  causing  explosive  outbreaks  with  high  mortality  rates.  Host  proteins  play  critical  roles  in  regulating  (positively  or  negatively)  EBOV  and  MARV  entry  and  exit,  and  their  identification  can  provide  biological  and  mechanistic  insight  critical  for  development  of  new  therapeutics  and  countermeasures.  The  overall  goal  of  my  thesis  project  was  to  identify  and  characterize  novel  host  regulators  of  the  filovirus  lifecycle,  with  a  specific  focus  on  filovirus  egress.  The  VP40  matrix  proteins  of  EBOV  (eVP40)  and  MARV  (mVP40)  are  the  key  drivers  of  virus  assembly  and  egress,  and  VP40  can  bud  independently  from  cells  in  the  form  of  virus-like  particles  (VLPs).  We  identified  E3  ubiquitin  ligase  Smad  Ubiquitin  Regulatory  Factor  2  (SMURF  2)  as  a  novel  interactor  with  VP40  that  positively  regulates  VP40  VLP  release.  Our  results  show  that  eVP40  and  mVP40  directly  interact  with  SMURF2  and  provide  evidence  that  the  eVP40-SMURF2  interaction  is  functional.  Notably,  expression  of  SMURF2  positively  regulates  VLP  egress,  while  siRNA  knockdown  of  endogenous  SMURF2  decreases  VLP  egress.  Additionally,  we  identified  actin-binding  cytoskeletal  crosslinking  proteins  filamin  A  (FLNa)  and  B  (FLNb)  as  important  regulators  of  both  EBOV  and  MARV  entry,  as  well  as  EBOV  exit.  EBOV  and  MARV  entry  is  mediated  by  the  EBOV  glycoprotein  (eGP)  or  MARV  glycoprotein  (mGP),  respectively,  and  our  results  show  that  entry  of  VSV-eGP  pseudotypes,  infectious  VSV-eGP-mCherry  recombinant  virus,  and  live  authentic  EBOV  and  MARV  was  inhibited  in  filamin  A  knockdown  (FLNaKD)  cells,  but  was  surprisingly  enhanced  in  filamin  B  knockdown  (FLNbKD)  cells.  Mechanistically,  our  findings  suggest  that  differential  regulation  of  macropinocytosis  by  FLNa  and  FLNb  likely  contributes  to  their  distinct  effects  on  filovirus  entry.  Interestingly,  we  found  that  budding  of  eVP40  VLPs,  eVP40-expressing  lentivirus  particles,  as  well  as  authentic  EBOV  was  impaired  significantly  in  both  FLNaKD  and  FLNbKD  cells.  In  sum,  we  identified  and  characterized  novel  host  regulators  of  the  filovirus  lifecycle,  which  will  provide  new  insights  into  the  development  of  antivirals  to  prevent  and/or  treat  filovirus  infections.
■590    ▼aSchool  code:  0175.
■650  4▼aVirology.
■650  4▼aCellular  biology.
■650  4▼aMolecular  biology.
■653    ▼aFiloviruses  Ebola
■653    ▼aFilamin  A
■653    ▼aFilamin  B
■653    ▼aFilovirus  lifecycle
■653    ▼aMarburg
■653    ▼aSMURF2
■690    ▼a0720
■690    ▼a0379
■690    ▼a0307
■71020▼aUniversity  of  Pennsylvania▼bCell  and  Molecular  Biology.
■7730  ▼tDissertations  Abstracts  International▼g85-03B.
■773    ▼tDissertation  Abstract  International
■790    ▼a0175
■791    ▼aPh.D.
■792    ▼a2023
■793    ▼aEnglish
■85640▼uhttp://www.riss.kr/pdu/ddodLink.do?id=T16933362▼nKERIS▼z이  자료의  원문은  한국교육학술정보원에서  제공합니다.
■980    ▼a202402▼f2024