MARC

 008250123s2024        us                              c    eng  d
■001000017161149
■00520250211151316
■006m          o    d                
■007cr#unu||||||||
■020    ▼a9798382830322
■035    ▼a(MiAaPQ)AAI31238546
■040    ▼aMiAaPQ▼cMiAaPQ
■0820  ▼a574
■1001  ▼aFagan,  Kelly.
■24510▼aGene  Editing  Strategies  for  Spinocerebellar  Ataxia  Type  1:  Therapeutic  Applications  and  Challenges  in  Editing  Transgenic  Models
■260    ▼a[Sl]▼bUniversity  of  Pennsylvania▼c2024
■260  1▼aAnn  Arbor▼bProQuest  Dissertations  &  Theses▼c2024
■300    ▼a121  p
■500    ▼aSource:  Dissertations  Abstracts  International,  Volume:  85-12,  Section:  B.
■500    ▼aAdvisor:  Davidson,  Beverly  L.
■5021  ▼aThesis  (Ph.D.)--University  of  Pennsylvania,  2024.
■520    ▼aSpinocerebellar  ataxia  type  1  (SCA1)  is  an  autosomal  dominant  neurodegenerative  disease  that  causes  progressive  loss  of  motor  coordination,  respiratory  issues,  and  eventual  death.  SCA1  is  caused  by  expansion  of  the  polyglutamine  repeat  region  in  the  ATXN1  gene.  Although  mutant  ATXN1  is  expressed  ubiquitously,  it  affects  primarily  Purkinje  cells  (PCs).  Currently  there  are  no  disease  modifying  treatments;  however,  previous  work  has  shown  the  potential  of  gene  therapy,  specifically  RNAi,  as  a  potential  modality.  Genome  editing  offers  a  possible  treatment  for  these  patients  but  has  yet  to  be  evaluated  in  SCA1  models.  I  hypothesize  that  Clustered  Regularly  Interspaced  Short  Palidromic  Repeats  (CRISPR)-Cas  editing  will  reduce  ATXN1  and  be  therapeutically  beneficial.  To  test  this,  I  first  selected  gene  editing  strategies  in  vitro  and  investigated  multiple  mouse  models  to  identify  an  optimal  in  vivo  system.  I  found  my  single  gRNA  strategy  targeting  at  the  exon-exon  junction  and  a  dual  gRNA  strategy  flanking  the  CAG  repeat  region  reduced  ATXN1  levels  by  approximately  56%  in  HEK293  cells.  I  performed  two  behavior  studies  in  mice  modeling  SCA1  with  expanded  ATXN1  CAG  repeats.  Though  the  first  attempt  was  unsuccessful,  I  leveraged  the  data  collected  to  alter  multiple  aspects  of  our  strategy  such  as  timing  of  delivery  and  the  mouse  model  used.  During  characterization  of  mouse  models,  I  assessed  the  number  of  transgenes  harbored  in  the  B05  model  of  SCA1.  Despite  having  5  copies  of  the  human  mutant  transgene,  the  single  gRNA  strategy  led  to  a  20%  reduction  of  ATXN1.  This  resulted  in  amelioration  of  behavior  deficits  without  increases  in  inflammatory  markers;  however,  I  did  not  observe  rescue  of  molecular  pathology.  Importantly,  the  editing  outcomes  were  consistent  in  induced  pluripotent  stem  cells  (iPSC)  neurons  derived  from  patients  with  SCA1,  promoting  the  translatability  of  the  approach  to  patients.  I  confirmed  dual  gRNA  editing  in  mice  but  saw  a  low  deletion  frequency;  less  than  1%  of  the  ATXN1  loci  evaluated  had  a  full-length  deletion.  This  thesis  successfully  demonstrates  the  validity  of  a  Cas9  meditated  therapeutic  approach  for  SCA1  while  simultaneously  highlighting  the  difficulties  in  transgenic  animal  models  faithfully  representing  gene  editing  outcomes.
■590    ▼aSchool  code:  0175.
■650  4▼aMolecular  biology
■650  4▼aCellular  biology
■650  4▼aNeurosciences
■650  4▼aGenetics
■653    ▼aSpinocerebellar  ataxia  type  1
■653    ▼aGene  editing
■653    ▼aNeurodegenerative  disease
■653    ▼aTransgenic  animal  models
■653    ▼aTransgenes
■690    ▼a0307
■690    ▼a0379
■690    ▼a0317
■690    ▼a0369
■71020▼aUniversity  of  Pennsylvania▼bCell  and  Molecular  Biology.
■7730  ▼tDissertations  Abstracts  International▼g85-12B.
■790    ▼a0175
■791    ▼aPh.D.
■792    ▼a2024
■793    ▼aEnglish
■85640▼uhttp://www.riss.kr/pdu/ddodLink.do?id=T17161149▼nKERIS▼z이  자료의  원문은  한국교육학술정보원에서  제공합니다.

미리보기

내보내기

chatGPT토론

Ai 추천 관련 도서