MARC

 008260126s2025        us                              c    eng  d
■001000017357451
■00520260202103514
■006m          o    d                
■007cr#unu||||||||
■020    ▼a9798315798286
■035    ▼a(MiAaPQ)AAI32037936
■040    ▼aMiAaPQ▼cMiAaPQ
■0820  ▼a616.4
■1001  ▼aKubo,  Hana.▼0(orcid)0000-0003-0998-2509
■24510▼aUnlocking  the  Granular  Details:  Creating  Granulosa-Like  Cells  and  Profiling  Follicle  Activation
■260    ▼a[Sl]▼bNorthwestern  University▼c2025
■260  1▼aAnn  Arbor▼bProQuest  Dissertations  &  Theses▼c2025
■300    ▼a142  p
■500    ▼aSource:  Dissertations  Abstracts  International,  Volume:  86-12,  Section:  B.
■500    ▼aAdvisor:  Laronda,  Monica  M.
■5021  ▼aThesis  (Ph.D.)--Northwestern  University,  2025.
■520    ▼aGranulosa  cells  are  critical  for  the  functions  of  the  ovary  during  both  fetal  development  and  postnatal  life.  Largely  their  two  main  roles  are  producing  steroid  and  peptide  hormones  and  supporting  germs  cells  through  oogenesis,  which  is  the  process  of  developing  a  fertilizable  egg.  These  functions  are  critical  in  the  onset  of  puberty,  maintenance  of  fertility,  and  overall  aspects  of  wellness  such  as  cardiovascular,  neurological,  and  bone  health.  Therefore,  there  is  a  need  to  better  understand  the  developmental  changes  that  granulosa  cells  undergo  from  fetal  development  till  the  end  of  the  reproductive  healthspan.Many  mechanisms  involved  in  ovarian  development  have  been  identified,  but  one  major  black  box  is  the  activation  of  the  key  ovarian  driver  FOXL2.  While  several  key  drivers  or  antagonists  of  FOXL2  expression  have  been  identified  in  genetic  mouse  models,  we  must  validate  these  in  human  models  for  translatability.  Separately,  there  is  a  clinical  need  to  increase  options  for  patients  who  require  hormone  replacement  therapy  that  would  better  mimic  functional  ovaries  and  a  biological  need  for  better  models  of  human  ovaries.To  achieve  the  above,  we  aimed  to  develop  granulosa-like  cells  (GLCs)  from  human  induced  pluripotent  stem  cells  (hiPSCs)  using  a  ligand-based  approach.  We  designed  a  rapid  ligand-based  monolayer  protocol  for  differentiating  hiPSCs  into  cells  that  express  markers  of  the  transient  developmental  lineages  and  steroidogenic  pathway  genes.  Our  data  demonstrates  that  inhibition  of  DKK1  is  effective  in  upregulating  FOXL2  expression  in  our  culture  system.  Single-cell  RNA-sequencing  (scRNA-seq)  analysis  revealed  that  granulosa  cell  genes  are  expressed  throughout  differentiation.  HSD17B1  is  expressed  but  at  low  levels,  suggesting  an  immature  granulosa  cell  phenotype.  The  GLCs  are  produced  through  a  simple  culture  and  could  be  expanded  to  support  granulosa  cell  functions  in  the  future.Granulosa  cells  are  also  key  in  the  development  of  a  fertilizable  egg.  Folliculogenesis,  which  is  the  process  where  oocytes,  with  support  from  the  granulosa  and  theca  cells,  mature  to  generate  a  fertilizable  egg.  Folliculogenesis  encompasses  many  stages  as  the  somatic  granulosa  and  theca  cells  support  oocytes  through  growth  and  maturation.  A  novel  follicle  stage,  between  primordial  and  transitional  stages,  was  identified  in  mice  and  defined  as  "zip."  Like  all  other  follicle  stages,  the  zip  stage  is  characterized  by  its  granulosa  cell  morphology.  Zip  follicles  are  marked  by  two  "wedge"  shaped  granulosa  cells  adjacent  to  each  other,  marking  the  transition  from  a  squamous  to  cuboidal  morphology.  The  wedge  granulosa  cell  morphology  in  zip  follicles  is  predicted  to  be  the  first  granulosa  cell  division  and  is  the  first  morphometric  sign  of  follicle  activation  in  murine  ovaries.  To  assess  the  biological  importance  of  the  wedge  morphology  of  granulosa  cells  during  mammalian  follicle  activation,  we  assessed  histological  sections  of  porcine,  bovine,  rhesus  monkey,  and  human  ovaries.  Zip  and  transitional  stages  were  conserved  in  all  four  species,  and  several  growth  dynamics  characterized  at  these  follicle  stages  were  conserved  between  species.  Oocyte  diameter  and  area  increased  between  the  primordial  and  transitional  stages  in  the  porcine  ovary  and  between  the  primordial  and  primary  stages  in  the  rhesus  monkey  ovary  but  appeared  unchanged  in  bovine  and  human  ovaries.  In  all  species  except  for  pigs,  granulosa  cell  number  and  height  increased  at  stages  earlier  than  observed  changes  in  the  oocyte.  Furthermore,  there  were  differences  in  the  percentage  of  zip  and  transitional  follicle  stages  present  in  the  cortical  region  across  species.  This  implies  that  there  may  be  species-dependent  activation  and  growth  mechanisms  that  require  further  study.  The  first  aim  demonstrated  that  DKK1  may  regulate  FOXL2  expression  during  human  ovarian  development.  The  developed  hiPSC  protocol  is  the  first  step  toward  investigating  ovarian  development  mechanisms  in  humans  and  generating  GLCs  for  ovarian  endocrinology  assays  and  personalized  cell-based  fertility  and  hormone  restoration  technologies  that  could  be  accessible  to  a  larger  patient  population.  The  second  aim  elucidated  key  morphometric  features  in  ovarian  follicles  during  activation,  which  is  a  major  bottleneck  in  the  maturation  of  oocytes  towards  a  fertilizable  egg.  The  parameters  defined  here  for  identifying  and  characterizing  the  zip  and  transitional  follicle  stages  across  species  can  act  as  a  tool  for  measuring  factors  that  perturb  or  induce  primordial  follicle  activation  or  effect  follicle  morphometric  parameters  in  support  of  future  innovations  in  assisted  reproductive  technologies  that  target  the  ovary.  Overall,  the  aims  in  this  thesis  deepened  our  understanding  of  granulosa  cells  across  the  developmental  and  reproductive  lifespan.
■590    ▼aSchool  code:  0163.
■650  4▼aEndocrinology
■650  4▼aDevelopmental  biology
■650  4▼aBiology
■650  4▼aCellular  biology
■653    ▼aFertility
■653    ▼aGranulosa  cells
■653    ▼aHormone  production
■653    ▼aInduced  pluripotent  stem  cells
■653    ▼aOvary
■690    ▼a0409
■690    ▼a0758
■690    ▼a0306
■690    ▼a0379
■71020▼aNorthwestern  University▼bDriskill  Graduate  Training  Program  in  Life  Sciences.
■7730  ▼tDissertations  Abstracts  International▼g86-12B.
■790    ▼a0163
■791    ▼aPh.D.
■792    ▼a2025
■793    ▼aEnglish
■85640▼uhttp://www.riss.kr/pdu/ddodLink.do?id=T17357451▼nKERIS▼z이  자료의  원문은  한국교육학술정보원에서  제공합니다.

Preview

Export

ChatGPT Discussion

AI Recommended Related Books