MARC

 008260311s2025        us                                    eng  d
■001000017357942
■00520260311091518.5
■006m          o    d                
■007cr|nu||||||||
■020    ▼a9798283479347
■040    ▼aMiAaPQD▼beng▼cMiAaPQD▼erda
■082    ▼a572.6
■1001  ▼aBulos,  Maya  L.▼eauthor.
■24510▼aPharmacological  Mechanisms  for  Targeting  the  Hippo  Pathway  ▼cMaya  L  Bulos
■260    ▼a[Sl]▼bThe  Scripps  Research  Institute▼c2025
■264  1▼aAnn  Arbor▼bProQuest  Dissertations  &  Theses▼c2025
■300    ▼a1  electronic  resource  (169  pages)
■336    ▼atext▼btxt▼2rdacontent
■337    ▼acomputer▼bc▼2rdamedia
■338    ▼aonline  resource▼bcr▼2rdacarrier
■500    ▼aSource:  Dissertations  Abstracts  International,  Volume:  86-12,  Section:  B.
■500    ▼aAdvisors:  Bollong,  Michael  J.    Committee  members:  Erb,  Michael  A.;  Cravatt,  Benjamin  F.;  Lamia,  Katja  A.;  Rape,  Michael.
■5021  ▼bPh.D.▼cThe  Scripps  Research  Institute▼d2025.
■520    ▼aA  key  question  in  developmental  biology  is  how  cellular  proliferation  and  organ  size  are  regulated  throughout  life.  Genetic  screens  for  tumor  suppressor  genes  in  Drosophila  identified  the  Hippo  signaling  pathway  as  a  master  regulator  of  cell  proliferation  and  tissue  growth.  The  pathway  can  be  activated  by  cell-cell  contacts,  metabolic  changes,  and  diverse  extrinsic  inputs  to  restrict  the  activity  of  the  downstream  effector  Yes-associated  protein  1  (YAP),  which  therefore  prevents  overgrowth  and  abnormal  cell  proliferation.  Despite  these  foundational  findings  from  over  20  years  ago,  there  is  not  a  complete  mechanistic  understanding  of  pathway  regulation,  and  recent  work  suggests  multiple  additional  signaling  nodes  regulate  the  Hippo  pathway.  These  signaling  nodes  not  only  reveal  fundamental  aspects  of  cell  biology  but  also  act  as  novel  druggable  targets  to  control  Hippo  pathway  activity.  The  Hippo  pathway  is  a  desirable  drug  target,  as  YAP  can  mobilize  and  proliferate  endogenous  progenitor  cells  to  heal  injuries.  Indeed,  studies  on  YAP  activation  through  genetic  methods  indicate  this  strategy  can  promote  regeneration  of  organs  such  as  skin,  intestine,  liver,  and  heart.  Studies  like  these  have  suggested  that  small  molecule  activators  of  YAP  may  have  potential  therapeutic  utility  in  diseases  involving  insufficient  tissue  repair.  However,  attempts  at  activating  YAP  pharmacologically  have  focused  on  targeting  the  core  kinases  of  the  pathway,  which  can  lead  to  undesirable  on-target  effects  due  to  their  activity  in  cell  cycle  control  and  transcription.  Therefore,  we  hypothesize  that  chemically  targeting  regulators  of  the  Hippo  pathway  that  specifically  relay  YAP-inhibitory  signals  will  provide  control  of  YAP  activation  without  affecting  other  essential  biological  processes.  Here,  we  show  that  unbiased  high-throughput  screening  of  new  and  repurposed  compounds  can  identify  small  molecule  activators  of  YAP.  These  compounds  target  proteins  involved  in  Hippo  pathway  responses  to  cell  polarity  and  density,  which  emphasizes  the  importance  of  these  signals  in  regulating  cellular  proliferation.We  first  explored  if  known  drugs  might  activate  YAP  by  conducting  a  reporter-based  screen  of  the  Repurposing,  Focused  Rescue,  and  Accelerated  Medchem  (ReFRAME)  small  molecule  library  (Chapter  2).  Of  the  15  identified  kinase  inhibitors  that  activate  YAP,  we  focused  on  SM04690,  a  compound  found  to  inhibit  canonical  Wnt  signaling.  We  found  that  by  inhibiting  CLK2,  SM04690  induces  alternative  splicing  of  exons  5  and  9  of  AMOTL2,  a  protein  integral  to  Hippo  pathway  activity.  Alternatively  spliced  AMOTL2  can  no  longer  localize  YAP  to  the  membrane,  so  YAP  is  free  to  enter  the  nucleus  and  turn  on  its  transcriptional  program.  Since  SM04690  broadly  modulates  alternative  splicing,  it  is  not  desirable  as  a  regenerative  therapeutic.  However,  it  is  a  useful  pharmacological  tool  to  better  understand  and  control  Hippo  pathway  activity.We  next  sought  to  identify  new  chemical  matter  that  can  activate  YAP.  A  compound  with  a  quinazoline  scaffold  was  selected  for  a  structure  activity  relationship  by  supplier  inventory  study  to  yield  the  small  molecule  hit,  sCMF231  (Chapter  3).  After  confirmation  of  sCMF231  as  a  YAP  activator,  we  generated  a  photo-activatable  probe  to  study  its  cellular  target.  We  found  that  our  compound  targets  FUBI,  a  ubiquitin-like  protein  with  no  established  connection  to  the  Hippo  pathway.  Proteomics  studies  to  find  covalent  targets  of  FUBI  identified  ANXA2,  a  protein  our  lab  previously  identified  as  a  central  regulator  of  the  Hippo  pathway.  We  found  that  sCMF231  treatment  induces  the  delocalization  of  ANXA2  from  the  plasma  membrane,  which  is  necessary  for  its  control  of  YAP  activity.  We  additionally  performed  proteomics  experiments  to  identify  machinery  required  for  FUBI  conjugation  to  target  proteins.  In  situ  co-immunoprecipitation  and  in  vitro  fubylation  assays  revealed  UBA1,  UBE2C,  and  APC/C  are  components  of  FUBI's  conjugation  machinery  to  ANXA2.  This  work  reveals  fubylation  as  a  novel  Hippo  pathway-specific  regulation  system  akin  to  ubiquitination.
■546    ▼aEnglish
■590    ▼aSchool  code:  1179
■650  4▼aCellular  biology
■650  4▼aBiochemistry
■650  4▼aPharmacology
■653    ▼aAlternative  splicing
■653    ▼aChemical  genetics
■653    ▼aHippo  pathway
■653    ▼aRegenerative  medicine
■653    ▼aUbiquitin-like  modification
■7102  ▼aThe  Scripps  Research  Institute▼bChemical  Biology.▼edegree  granting  institution.
■7201  ▼aBollong,  Michael  J.▼edegree  supervisor.
■7730  ▼tDissertations  Abstracts  International▼g86-12B.
■85640▼uhttp://www.riss.kr/pdu/ddodLink.do?id=T17357942▼nKERIS▼z이  자료의  원문은  한국교육학술정보원에서  제공합니다.

미리보기

내보내기

chatGPT토론

Ai 추천 관련 도서